Bahasa :
SWEWE Anggota :Login |Pendaftaran
Cari
Masyarakat ensiklopedia |Ensiklopedia Jawaban |Kirim pertanyaan |Pengetahuan kosakata |Upload pengetahuan
Sebelumnya 1 Berikutnya Pilih Halaman

Peta Fisik

Definisi Teknologi

Nama Cina: peta Fisik

Nama Inggris: fisik peta

Definisi: DNA penjelasan tingkat molekul gen atau antara gen dan hubungan antara pola fragmen DNA.Ilmu terapan: Ilmu Perikanan (subjek), pemuliaan air (dua mata pelajaran)

Atas isi oleh Komite Persetujuan Teknologi Sains Nasional dan diumumkan

Peta fisik adalah penggunaan pembatasan endonuklease ke dalam fragmen kromosom tumpang tindih urutan ditentukan sesuai dengan urutan hubungan antara fragmen, serta jarak fisik antara penanda genetik pasangan basa (bp), atau kilobases (kb) atau megabase ( Mb) dari peta. Dalam peta fisik genom manusia, misalnya, mencakup dua makna, salah satu bisa didistribusikan ke seluruh bendera urutan genom 30000 poin (STS, yang didefinisikan dan tersedia kromosom spesifik lokasi PCR amplifikasi satu salinan dari urutan).

Pengantar singkat

Peta fisik (Fisika Peta): peta fisik posisi digambarkan DNA marker dapat diidentifikasi dan jarak antara satu sama lain (dalam pasangan basa adalah ukuran jumlah unit), yang dapat mengidentifikasi penanda meliputi pembatasan endonuklease pencernaan gen lokus. Peta fisik tidak mempertimbangkan kemungkinan dua penanda genetik dan informasi lain bersama-sama. Untuk genom manusia, peta fisik tebal jalur pola pewarnaan kromosom, pola halus untuk mengukur urutan nukleotida penuh DNA.

Tujuan

Gen dari klon cDNA yang diperoleh disekuensing pada kedua ujung cDNA sekitar 200bp, primer dirancang dan disintesis, masing-masing, oleh DNA cDNA dan genomik sebagai template diamplifikasi, membandingkan dan dimurnikan pita spesifik, probe radioaktif dibuat menggunakan STS Genomic hibridisasi in situ, ada tanda bahwa setiap 100KB, kedua dibangun atas dasar fragmen besar yang meliputi setiap kromosom: yang pertama adalah untuk membangun beberapa ratus kb YAC (kromosom buatan ragi), merencanakan YAC ini, diperoleh terus menerus tumpang tindih klon YAC, disebut pemetaan fisik presisi rendah, dan puluhan tingkat kb fragmen DNA pada YAC acak dipotong menjadi kosmid disebut presisi pemetaan pemetaan fisik.

Ciri

Karena pembatasan endonuklease memotong rantai DNA didasarkan pada urutan tertentu, urutan nukleotida DNA yang berbeda, setelah pencernaan akan dihasilkan setelah fragmen DNA dengan panjang yang berbeda, sehingga merupakan peta pembatasan unik . Oleh karena itu, DNA adalah peta fisik karakteristik struktur molekul DNA. DNA adalah molekul besar, diproduksi oleh fragmen DNA enzim restriksi untuk sequencing reaksi hanya sebagian sangat kecil dari fragmen DNA ini di posisi antara rantai pertama harus memecahkan masalah, itu adalah peta fisik dari urutan DNA Penentuan yayasan juga diartikan sebagai cetak biru untuk membimbing sekuensing DNA. Secara garis besar, sekuensing DNA dari fisik produksi peta dimulai, itu adalah langkah pertama sekuensing. Membuat peta fisik DNA Ada beberapa cara, di sini untuk memilih sebuah metode sederhana yang umum ─ ─ berlabel fragmen metode dicerna sebagian untuk menggambarkan prinsip-prinsip pembuatan peta.

Langkah

Penentuan DNA dicerna sebagian dengan peta fisik terdiri dari dua langkah dasar:

(A) degradasi lengkap: Pilih sesuai pembatasan endonuklease untai DNA yang akan diuji (radioisotop sudah ditandai) benar-benar terdegradasi, produk degradasi dipisahkan dengan elektroforesis gel setelah autoradiografi, spektrum yang diperoleh terdiri dari DNA untai Jumlah dan ukuran fragmen.

(2) degradasi parsial: the-berlabel akhir DNA, salah satu rangkaian dari uji pita tracer isotop, enzim dan kemudian menggunakan degradasi parsial yang sama dari rantai DNA, yaitu dengan mengontrol kondisi reaksi sehingga enzim memotong rantai kerusakan acak DNA, dan Hindari semua sayatan fraktur benar-benar terdegradasi terjadi. Parsial hidrolisat sama untuk pemisahan elektroforesis dan autoradiografi. Membandingkan peta autoradiografi dua langkah, berdasarkan ukuran fragmen dan perbedaan antara masing-masing fragmen restriksi lainnya dapat dibuang di lokasi rantai DNA. Berikut adalah penentuan peta fisik dari DNA dan histon penjelasan rinci.

Menghasilkan

Gen ini 5900bp, dengan enzim restriksi Hpa Ⅱ degradasi lengkap dari DNA menghasilkan fragmen lima ukuran, pemisahan elektroforesis dan standar referensi molekul pita DNA berat diketahui, bahwa ukuran fragmen tersebut adalah 1930,1690,1020, 950 dan 310bp. Sulit untuk berspekulasi pada DNA ini memiliki empat Hpa Ⅱ sayatan, tapi lokasi sayatan dan lima fragmen dari urutan genom lengkap cara ini tidak bisa tahu. Selanjutnya, akhir-berlabel fragmen DNA dari degradasi parsial Hpa Ⅱ, karena masing-masing dipotong secara acak istirahat, jumlah fragmen yang dihasilkan oleh produk degradasi lengkap lebih jelas. Namun, setelah elektroforesis, autoradiografi mungkin hanya muncul di peta fragmen DNA akhir-label. Dalam hal DNA diuji untuk tanda di sebelah kiri, maka grafik akan menunjukkan 4210,3260,2950 autoradiografi dan 1020bp empat band. Fragmen terkecil (1020bp) dan produk degradasi lengkap dari fragmen yang sama, harus diposisikan di ujung kiri dari gen, sedangkan fragmen terbesar (4210bp) dan genom lengkap (5900bp) fragmen perbedaan (1690bp) pasti harus diposisikan di ujung kanan gen , Sisa tiga fragmen (1930,930 dan 310bp) ditempatkan berdekatan fragmen dicerna sebagian sesuai dengan perbedaan yang sangat mudah untuk menentukan. Menyimpulkan bahwa lima fragmen gen pada urutan (kiri → kanan): 1020 -1930-310-950 - 1690. Pemetaan fisik dan sekuensing DNA prinsip sangat mirip, baik melalui panjang fragmen untuk berspekulasi posisi, perbedaan tersebut sequencing untuk menentukan nukleotida (dasar) posisi, dan dalam hal ini adalah untuk menentukan lokasi klip. Penentuan peta fisik DNA, dapat dilakukan untuk setiap fragmen analisis urutan nukleotida. Semua fragmen dalam penentuan urutan DNA, masing-masing fragmen dari fisik peta "tambal sulam" dibuat pada semua uji urutan nukleotida rantai DNA. Gene sequencing adalah apa yang kita semua ingin mencapai tujuan, umumnya panjang dari genom manusia lebih dari 10Kb, gen yang besar bisa sampai 200KB, untuk melengkapi gen penuh sequencing menjadi banyak pekerjaan. Tugas-tugas ini dapat mengambil berbagai cara yang berbeda, tetapi ide dasarnya adalah sama, yaitu, dalam menentukan atas dasar peta fisik, dan kemudian sekuensing DNA.


Sebelumnya 1 Berikutnya Pilih Halaman
Pemakai Ulasan
Belum ada komentar
Saya ingin komentar [Pengunjung (13.58.*.*) | Login ]

Bahasa :
| Periksa kode :


Cari

版权申明 | 隐私权政策 | Hak cipta @2018 Dunia pengetahuan ensiklopedis